ಪ್ರತಿದೀಪ್ತಿ ಮೈಕ್ರೋಸ್ಕೋಪಿ: ವಿಧಾನದ ತತ್ವಗಳನ್ನು

ಹೀರಿಕೆ ಮತ್ತು ಬೆಳಕಿನ ಮತ್ತಷ್ಟು ಅಜೈವಿಕ ಮತ್ತು ಜೈವಿಕ ದ್ರವಗಳ ಮರು ಹೊರಸೂಸುವಿಕೆ phosphorescence ಅಥವಾ ಪ್ರತಿದೀಪ್ತಿ ಪರಿಣಾಮವಾಗಿದೆ. ವಿದ್ಯಮಾನಗಳ ನಡುವೆ ವ್ಯತ್ಯಾಸ ಬೆಳಕಿನ ಪ್ರಸರ ಹೀರುವಿಕೆ ಮತ್ತು ಹೊರಸೂಸುವಿಕೆಯನ್ನು ನಡುವೆ ಮಧ್ಯಂತರದ ಅವಧಿಯಾಗಿದೆ. ಈ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಗಳ ಪ್ರತಿದೀಪ್ತಿ phosphorescence ಸಂದರ್ಭದಲ್ಲಿ, ಬಹುತೇಕ ಏಕಕಾಲದಲ್ಲಿ ಸಂಭವಿಸುತ್ತದೆ ಮಾಡಿದಾಗ - ಕೆಲವು ವಿಳಂಬದೊಂದಿಗೆ.

ಐತಿಹಾಸಿಕ ಮಾಹಿತಿ

1852 ರಲ್ಲಿ ಬ್ರಿಟಿಷ್ ವಿಜ್ಞಾನಿ ಸ್ಟೋಕ್ಸ್, ಮೊದಲ ಪ್ರತಿದೀಪ್ತಿ ವಿವರಿಸಲಾಗಿದೆ. ಅವರು ಪ್ರಯೋಗಗಳನ್ನು ಪರಿಣಾಮವಾಗಿ ಹೊಸ ಪದ ಪರಿಚಯಿಸಲಾಯಿತು fluorspar, ನೇರಳಾತೀತ ಬೆಳಕಿನ ಅಡಿಯಲ್ಲಿ ಕೆಂಪು ಬೆಳಕನ್ನು ಇದು. ಸ್ಟೋಕ್ಸ್ ಒಂದು ಕುತೂಹಲಕಾರಿ ಸಂಗತಿಯನ್ನು ಗಮನಿಸಿದರು. ಇದು ಪ್ರತಿದೀಪಕ ವಿಕಿರಣದ ತರಂಗಾಂತರ ಯಾವಾಗಲೂ ಉದ್ರೇಕ ಬೆಳಕಿನ ಹರಿವು ಹೆಚ್ಚು ಎಂದು ಕಂಡುಬರುತ್ತದೆ.

19 ನೇ ಶತಮಾನದಲ್ಲಿ ಕಲ್ಪನೆ ದೃಢಪಡಿಸಲು ಹಲವು ಪ್ರಯೋಗಗಳನ್ನು ಮಾಡಲಾಗಿದೆ. ಅವರು ಮಾದರಿಗಳ ವಿವಿಧ ನೇರಳಾತೀತ ಬೆಳಕಿನ ಪ್ರಭಾವದ ಅಡಿಯಲ್ಲಿ ಪ್ರತಿದೀಪಕಕ್ಕೆ ತೋರಿಸಿದರು. ವಸ್ತುಗಳ ಪೈಕಿ ಇತರ ವಿಷಯಗಳ ಬಂದಿದೆ ಹರಳುಗಳು, ರಾಳಗಳು, ಖನಿಜಗಳು, ಹರಿತ್ತು, ಕಚ್ಚಾ ಔಷಧಗಳು, ಅಜೈವಿಕ ಸಂಯುಕ್ತಗಳು, ಜೀವಸತ್ವಗಳು, ತೈಲಗಳು ಸೇರಿವೆ. ಜೈವಿಕ ಪರೀಕ್ಷೆಗಳ ವರ್ಣಗಳು ನೇರ ಬಳಕೆ 1930 ರಲ್ಲಿ ಕೇವಲ ಆರಂಭಿಸಿದರು

ಪ್ರತಿದೀಪ್ತಿ ಮೈಕ್ರೋಸ್ಕೋಪಿ: ವಿವರಣೆ

20 ನೇ ಶತಮಾನದ ಅಧ್ಯಯನಗಳು ಮೊದಲಾರ್ಧದಲ್ಲಿ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಕೆಲವು ಉಪಕರಣಗಳು ಹೆಚ್ಚಿನ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಪ್ರದರ್ಶಿಸಿದರು. стал важнейшим инструментом и в биомедицинских, и в биологических исследованиях. ಇದು ಸಾಧ್ಯವಾಗಲಿಲ್ಲ ವಿಧಾನಗಳು ವ್ಯತಿರಿಕ್ತ ಸಾಧಿಸಬಹುದು ಪ್ರದರ್ಶನ, ಧನ್ಯವಾದಗಳು, ಪ್ರತಿದೀಪ್ತಿ ಮೈಕ್ರೋಸ್ಕೋಪಿ ವಿಧಾನ ಬಯೋಮೆಡಿಕಲ್ ಮತ್ತು ಜೈವಿಕ ಸಂಶೋಧನೆ ಅತ್ಯಗತ್ಯ ಸಾಧನವಾಗಿದೆ. ಸಮಾನವಾಗಿ ಪ್ರಮುಖ ಫಲಿತಾಂಶಗಳು ಪಡೆದ, ಮತ್ತು ವಸ್ತುಗಳಿಗೆ ಮಾಡಲಾಯಿತು.

? ಏನು ಅನುಕೂಲಗಳು ಪ್ರತಿದೀಪ್ತಿ ಮೈಕ್ರೋಸ್ಕೋಪಿ ವಿಧಾನ ಮಾಡುತ್ತದೆ? ಇಲ್ಲಿನ ವೈಶಿಷ್ಟ್ಯ ಜೀವಕೋಶಗಳು ಮತ್ತು ಉಪಸೂಕ್ಷ್ಮದರ್ಶಕ ಘಟಕಗಳನ್ನು ಆಯ್ಕೆ ಸಾಧ್ಯವಾಗಿದೆ ಹೊಸ ವಸ್ತುಗಳನ್ನು ಬಳಸಿ. ಪ್ರತಿದೀಪ್ತಿ ಮೈಕ್ರೋಸ್ಕೋಪಿ ಒಂಟಿ ಅಣುಗಳನ್ನು ಪತ್ತೆ ಮಾಡಬಹುದು. ವರ್ಣಗಳು ವಿವಿಧ ಏಕಕಾಲದಲ್ಲಿ ಅನೇಕ ಐಟಂಗಳನ್ನು ಗುರ್ತಿಸುತ್ತದೆ. ಉಪಕರಣಗಳು, ಇದು ಅನುಕ್ರಮವಾಗಿ, ಮಾದರಿ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಗುಣಗಳನ್ನು ಅವಲಂಬಿಸಿರುತ್ತದೆ ವಿವರ್ತನೆಯ ಮಿತಿಯನ್ನು ಸೀಮಿತ ದೈಶಿಕ ಹೊರತಾಗಿಯೂ, ಈ ಕೆಳಗೆ ಅಣುಗಳ ಗುರುತಿನ ಸಾಕಷ್ಟು ಸಾಧ್ಯ. ವಿಕಿರಣ ಕ್ರಿಯೆ ಪ್ರದರ್ಶನವನ್ನು autofluorescence ನಂತರ ವಿವಿಧ ಮಾದರಿಗಳನ್ನು. ಈ ವಿದ್ಯಮಾನ ವ್ಯಾಪಕವಾಗಿ ಶಿಲಾ ಉತ್ಪತ್ತಿ, ಸಸ್ಯವಿಜ್ಞಾನ, ಅರೆವಾಹಕ ಉದ್ಯಮದಲ್ಲಿ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ.

ವೈಶಿಷ್ಟ್ಯಗಳು

ಪ್ರಾಣಿಗಳ ಅಂಗಾಂಶಗಳಲ್ಲಿ ಅಥವಾ ರೋಗಕಾರಕಗಳು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಸಂಕೀರ್ಣ ಅಥವಾ ತುಂಬಾ ದುರ್ಬಲ ಅಥವಾ ಬಲವಾದ ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾಗಿ autofluorescence ಅಧ್ಯಯನ. ಆದರೆ ಅಧ್ಯಯನಗಳು ಮೌಲ್ಯವನ್ನು ಒಂದು ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ತರಂಗಾಂತರದಲ್ಲಿ ಹರ್ಷ ವಸ್ತು ಅಂಶಗಳಾಗಿ ಪರಿಚಯ ಮತ್ತು ಅಗತ್ಯ ಬೆಳಕಿನ ಹರಿವಿನ ತೀವ್ರತೆ ಹೊರಸೂಸುವ ವಶಪಡಿಸಿಕೊಂಡಿತು. Fluorochromes ರಚನೆಗಳು (ಗೋಚರ ಅಥವಾ ಅದೃಶ್ಯ) ಜೋಡಿಸಲಾದ ಸ್ವತಂತ್ರವಾಗಿ ಸಾಮರ್ಥ್ಯವನ್ನು ವರ್ಣಗಳು ವರ್ತಿಸುತ್ತವೆ. ಹೀಗೆ ಅವರು ಲಕ್ಷ್ಯದ ಹೆಚ್ಚಿನ ಆಯ್ಕೆಗಳು ಹಾಗೂ ಕ್ವಾಂಟಮ್ ಇಳುವರಿ ಹೊಂದಿವೆ.

стала широко применяться с появлением естественных и синтетических красителей. ಪ್ರತಿದೀಪ್ತಿ ಮೈಕ್ರೋಸ್ಕೋಪಿ ವ್ಯಾಪಕವಾಗಿ ನೈಸರ್ಗಿಕ ಮತ್ತು ಕೃತಕ ವರ್ಣಗಳನ್ನು ಆಗಮನದೊಂದಿಗೆ ಬಳಸಲಾಗಿದೆ. ಅವರು ಹೊರಸೂಸುವ ಮತ್ತು ಪ್ರಚೋದನೆಯ ಕೆಲವು ತೀವ್ರತೆಯ ಪ್ರೊಫೈಲ್ ಹೊಂದಿರುವುದಾಗಿ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಜೀವ ಗುರಿಗಳನ್ನು ಗುರಿ.

ಪ್ರತಿಯೊಂದು ಅಣುಗಳನ್ನು ಗುರುತಿಸುವಿಕೆ

ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಆದರ್ಶ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳ, ನೀವು ಒಂದು ಪ್ರತ್ಯೇಕ ಅಂಶ ಗ್ಲೋ ನೋಂದಾಯಿಸಿಕೊಳ್ಳಬಹುದು. ಇದಕ್ಕಾಗಿ, ಇತರ ವಿಷಯಗಳ ಪೈಕಿ, ಇದು ಅಗತ್ಯ ಡಿಟೆಕ್ಟರ್ ಮತ್ತು ಆಪ್ಟಿಕಲ್ ಹಿನ್ನೆಲೆಯುಳ್ಳ ಅನ್ನು ಸಾಕಷ್ಟು ಕಡಿಮೆ ಶಬ್ದ ಒದಗಿಸುವುದು. ವೈಫಲ್ಯ Fluorescein ಅಣು ಕಾರಣ photobleaching 300 ಸಾವಿರ. ಫೋಟಾನ್ಗಳನ್ನು ಹೊರಸೂಸುತ್ತವೆ ಮಾಡಬಹುದು. ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯ 20% ಸಂಗ್ರಹ ಪರಿಣಾಮಕಾರಿಯಾಗಿ ಮತ್ತು ಸುಮಾರು 60 ಸಾವಿರ ಮೊತ್ತವನ್ನು ಅವುಗಳನ್ನು ನೋಂದಾಯಿಸಿಕೊಳ್ಳಬಹುದು.

, основанная на лавинных фотодиодах или электронном умножении, позволяла исследователям наблюдать поведение отдельных молекул на протяжении секунд, а в ряде случаев и минут. ಹಠಾತ್ ಫೋಟೋಡಿಸ್ಗಳಿವೆ ಅಥವಾ ವಿದ್ಯುನ್ಮಾನ ಗುಣಾಕಾರ ಆಧರಿಸಿ ಪ್ರತಿದೀಪ್ತಿ ಸೂಕ್ಷ್ಮ ದರ್ಶನ, ಎರಡನೇ ಮೂಲಕ ಪ್ರತಿಯೊಂದು ಅಣುಗಳನ್ನು ವರ್ತನೆಯನ್ನು ವೀಕ್ಷಿಸಲು ಸಂಶೋಧಕರು ಅವಕಾಶ, ಮತ್ತು ಕೆಲವು ಸಂದರ್ಭಗಳಲ್ಲಿ ಸಹ ನಿಮಿಷಗಳು.

ಸಂಕೀರ್ಣತೆ

ಆಪ್ಟಿಕಲ್ ಶಬ್ದ ಹಿನ್ನೆಲೆ ನಿಗ್ರಹ ಪರವಾಗಿ ಪ್ರಮುಖ ಸಮಸ್ಯೆ. ಕಾರಣ ಶೋಧಕಗಳು ಮತ್ತು ಮಸೂರಗಳನ್ನು, ಕೆಲವು autofluorescence ಪ್ರದರ್ಶಿಸುವ ವಿನ್ಯಾಸ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ ವಸ್ತುಗಳ ಅನೇಕ, ಆರಂಭಿಕ ಹಂತಗಳಲ್ಲಿ ವಿಜ್ಞಾನಿಗಳ ಪ್ರಯತ್ನಗಳು ಕಡಿಮೆ ಪ್ರತಿದೀಪ್ತಿ ಹೊಂದಿರುವ ಪರಿಕರಗಳ ಉತ್ಪಾದನೆಯಲ್ಲಿ ಆಧಾರಿತ ಎಂದು ವಾಸ್ತವವಾಗಿ. ಆದಾಗ್ಯೂ, ತರುವಾಯದ ಪ್ರಯೋಗಗಳಲ್ಲಿ ಹೊಸ ತೀರ್ಮಾನಗಳು ಕಾರಣವಾಗಿವೆ. , основанная на полном внутреннем отражении, позволяет достичь низкого фона и высокоинтенсивного возбуждающего светового потока. ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾಗಿ, ಇದು ಪ್ರತಿದೀಪ್ತಿ ಸೂಕ್ಷ್ಮದರ್ಶಕ ಒಟ್ಟು ಪ್ರತಿಫಲನವನ್ನು ಅವಲಂಬಿಸಿರುತ್ತದೆ, ಇದು ಒಂದು ಕಡಿಮೆ ಹಿನ್ನೆಲೆ ಮತ್ತು ಉನ್ನತ ತೀವ್ರತೆಯನ್ನು ಉದ್ರೇಕ ಬೆಳಕಿನ ಸಾಧಿಸಲು ಅನುಮತಿಸುವ ಕಂಡುಬಂತು.

ಯಾಂತ್ರಿಕ

, основанной на полном внутреннем отражении, заключаются в использовании быстрозатухающей или нераспространяющейся волны. ಒಟ್ಟು ಪ್ರತಿಫಲನವನ್ನು ಅವಲಂಬಿಸಿರುತ್ತದೆ ಪ್ರತಿದೀಪ್ತಿ ಮೈಕ್ರೋಸ್ಕೋಪಿ ತತ್ತ್ವಗಳಿಗೆ ಮಾಸುವ ಅಲೆ ಅಥವಾ ಮಾಸುವ ಬಳಕೆ. ಇದು ವಿವಿಧ ಮಾಧ್ಯಮ ಗಡಿಯಲ್ಲಿ ಸಂಭವಿಸುತ್ತದೆ ವಕ್ರೀಕರಣ ಸೂಚ್ಯಂಕಗಳು. ಈ ಸಂದರ್ಭದಲ್ಲಿ, ಬೆಳಕಿನ ಕಿರಣದ ಪ್ರಿಸ್ಮ್ ಮೂಲಕ ಹಾದುಹೋಗುತ್ತದೆ. ಇದು ಒಂದು ಹೆಚ್ಚಿನ ವಕ್ರೀಕಾರಕ ಸೂಚಿಯನ್ನು ಪ್ಯಾರಾಮೀಟರ್ ಹೊಂದಿದೆ.

ಪ್ರಿಸ್ಮ್ ಕಡಿಮೆ ನಿಯತಾಂಕ ನೀರಿನ ದ್ರಾವಣದಲ್ಲಿ ಅಥವಾ ಗಾಜಿನ ಪಕ್ಕದಲ್ಲಿ. ಹೆಚ್ಚು ವಿಮರ್ಶಾತ್ಮಕ ಎಂದು ಒಂದು ಕೋನದಲ್ಲಿ ಇದು ನಿರ್ದೇಶಿಸುತ್ತದೆ ಬೆಳಕಿನ ಕಿರಣವೊಂದು ವೇಳೆ, ಕಿರಣದ ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿ ಇಂಟರ್ಫೇಸ್ಗಳ ಪ್ರತಿಬಿಂಬಿತವಾಗಿದೆ. ಈ ವಿದ್ಯಮಾನವು ಪ್ರತಿಯಾಗಿ, nonpropagating ಅಲೆಗಳು ಕಾರಣವಾಗುತ್ತದೆ. ಅರ್ಥಾತ್, ವಿದ್ಯುತ್ಕಾಂತೀಯ ಕ್ಷೇತ್ರದಲ್ಲಿ ದೂರ ಕಡಿಮೆ 200 ನ್ಯಾನೋ ಮೀಟರ್ ಕಡಿಮೆ ವಕ್ರೀಭವನ ಸೂಚಕ ನಿಯತಾಂಕ ಒಂದು ಮಾಧ್ಯಮಕ್ಕೆ ತೂರಿಹೋಗುವ.

ಮಾಸುವ ತರಂಗ ಬೆಳಕಿನ ತೀವ್ರತೆಯನ್ನು fluorophores ಪ್ರಚೋದಿಸಲು ಸಾಕಷ್ಟು ಎಂದು. ಆದಾಗ್ಯೂ, ಅದರ ಅತ್ಯಂತ ಕಡಿಮೆ ಆಳದ, ಅದರ ಪರಿಮಾಣ ಸಣ್ಣ ಇರುತ್ತದೆ. ಪರಿಣಾಮವಾಗಿ ಕೆಳಮಟ್ಟದ ಹಿನ್ನೆಲೆ ಹೊಂದಿದೆ.

ಮಾರ್ಪಾಡು

ಪ್ರತಿದೀಪ್ತಿ ಮೈಕ್ರೋಸ್ಕೋಪಿ ಪೂರ್ಣ ಆಂತರಿಕ ಪ್ರತಿಫಲನವನ್ನು ಅವಲಂಬಿಸಿರುತ್ತದೆ, ಎಪಿ-ಬೆಳಕಿನೊಂದಿಗೆ ಅನುಷ್ಠಾನಗೊಳಿಸಬಹುದು. ಈ ಉನ್ನತವಾದ ಸಾಂಖ್ಯಿಕ ರಂಧ್ರವು ಲೆನ್ಸ್ ಅಗತ್ಯವಿದೆ (ಕನಿಷ್ಠ 1.4, ಆದರೆ ಇದು 1.45-1.6 ತಲುಪಿದ ಅತಿಮುಖ್ಯ), ಮತ್ತು ಭಾಗಶಃ ಕ್ಷೇತ್ರದಲ್ಲಿ ಉಪಕರಣ ಪ್ರಕಾಶಿಸುವಂತೆ. ನಂತರದ ಒಂದು ಸಣ್ಣ ಸ್ಪಾಟ್ ಗಾತ್ರದೊಂದಿಗೆ ಸಾಧಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಇದು ಹರಿವಿನ ಒಂದು ಭಾಗವು ತಡೆಹಿಡಿಯಲ್ಪಟ್ಟಿದೆ ತೆಳು ರಿಂಗ್, ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಹೆಚ್ಚಿನ ಏಕರೂಪತೆಯನ್ನು. ನಂತರ ಪೂರ್ಣ ಪ್ರತಿಫಲನವು ಇಲ್ಲ ತೀವ್ರ ಕೋನ,, ನಾವು ಲೆನ್ಸ್ ಅದ್ದುವುದನ್ನು ಮಧ್ಯಮ ಮತ್ತು ಸೂಕ್ಷ್ಮದರ್ಶಕದ ಕವರ್ ಗಾಜಿನ ವಕ್ರೀಭವನದ ಒಂದು ಉನ್ನತ ಮಟ್ಟದ ಅಗತ್ಯವಿದೆ.